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無菌檢查為何需要14天培養期

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  • 發布時間： 2025-03-25
2025-03-25

無菌檢查試驗通用培養基為硫乙醇酸鹽流體培養基和胰酪大豆胨液體培養基。

 

硫乙醇酸鹽流體培養基主要用于厭氧菌的培養，也可用于需氧菌培養；硫乙醇酸鹽流體培養基的培養溫度為30~35℃；硫乙醇酸鹽流體培養基在培養期間不要劇烈震動或搖晃培養基，以盡量減少培養基通氣。
胰酪大豆胨液體培養基用于真菌和需氧菌的培養；胰酪大豆胨液體培養基的培養溫度為20~25℃；胰酪大豆胨液體培養基在培養期間可以輕緩搖動，以增加培養基的通氣。 
如在加入供試品后，或在培養過程中，培養基出現渾濁，培養14天后，不能從外觀上判斷有無微生物生長，可取該培養液不少于1ml 轉種至同種新鮮培養基中，將原始培養物和新接種的培養基繼續培養不少于4天，觀察接種的同種新鮮培養基是否再出現渾濁；或取培養液涂片、染色、鏡檢，判斷是否有菌。USP 和 EP 規定的出現渾濁后的處理程序與《中國藥典》 一致，原培養容器與轉種培養容器的總培養時間為不少于18天。
長達14天的培養期的主要原因：
無菌產品中存活的微生物在生產工藝過程中都會經歷一定程度的損傷而處于亞致死的狀態，它們需要有一段修復的時間才能生長繁殖到肉眼看得到的程度而被檢出；
也有可能在抑菌類產品中一直被抑制著的污染微生物處于亞致死狀態，需要隨著培養時間的延長或抑菌性徹底消除后才能得以繁殖到肉眼看得到的程度而被檢出；
還有可能產品中污染的微生物本身屬于生長遲緩的微生物，例如，痤瘡丙酸桿菌是無菌灌封中令人頭痛的一種微生物，根據經驗，該微生物直到在培養基中培養12天后才能生長到肉眼可以觀察的濃度。所以無菌檢查法培養不少于14天是有必要的。 當然，受到損傷的微生物也需要一定的延遲期才能恢復生長。
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